
NOTE
在高效液相色谱应用中,色谱柱实现组分分离,检测器负责组分识别与定量。不同检测器的检测原理不一样,适用目标物、灵敏度、使用限制差异巨大。本文一次性讲清三类主流检测器。
原理:基于待测物质在特定紫外-可见光波长下对光产生吸收,符合朗伯-比尔定律进行定量。光源多为氘灯,波长覆盖 190~700 nm。
APPLICABLE SAMPLES
适用样品
含有共轭双键、苯环等紫外吸收基团的化合物:食品防腐剂、色素、兽药、农药、有机酸、部分药物、环境有机污染物等。是液相最通用检测器。
ADVANTAGES
优势
• 灵敏度适中,基线稳定,维护简单;
• 支持双波长同时检测,可做峰纯度检查;
• 可梯度洗脱,方法开发灵活;
• 配套技术成熟,岛津 Essentia 系列紫外检测器波长重 现性可达 ±0.1 nm,长期重复性优异。
LIMITATIONS
局限性
无紫外吸收的物质无法检测(糖类、醇类、甘油等)。
原理:连续对比参比池与样品池流动相折射率差异。只要样品组分和流动相折射率不一样,就可以出峰,属于通用型检测器。
APPLICABLE SAMPLES
适用样品
没有紫外吸收的物质:糖类、糖醇、甘油、脂肪酸、植物油单体、淀粉水解产物等。糖类检测几乎首选示差检测器。
ADVANTAGES
优势
• 通用型,不需要目标物带有发色基团。
LIMITATIONS
局限性
• 不能用于梯度洗脱,流动相组成变化会直接改变折射率,基线严重漂移,只能等度方法;
• 对温度极其敏感,池体温度需要稳定控制;
• 灵敏度低于荧光检测器,适合高含量组分检测,不适合微量痕量检测。
实验室采购提示:示差折光检测器选型时,重点关注噪声、漂移指标,低漂移指标可以显著降低定量误差。
原理:物质被特定激发光照射后发射荧光,通过检测荧光强度定量。
APPLICABLE SAMPLES
适用样品
自带荧光基团,或者可以通过衍生反应生成荧光衍生物的物质:如多环芳烃、黄曲霉毒素、氨基酸、部分兽药。三类检测器中,痕量检测灵敏度最高。
ADVANTAGES
优势
• 选择性强,基质干扰小;
• 检出限极低,适合 ppb 级别痕量分析。
岛津 RF-20A 荧光检测器,水拉曼峰灵敏度可达 1200 以上,适合微量污染物检测。
LIMITATIONS
局限性
• 无荧光特性的物质无法直接检测,部分样品需要衍生前处理;
• 光源氙灯有使用寿命,需要定期维护更换。
检测器 | 核心特点 | 适合场景 | 不能做 |
UV 紫外 | 通用 · 稳定 · 性价比高 | 防腐剂 · 兽药 · 药物带紫外吸收样品 | 无发色团糖类 |
RID 示差 | 通用型 · 测折射率 | 糖类 · 醇类 · 甘油等高含量组分 | 梯度洗脱 · 痕量检测 |
RF荧光 | 高灵敏 · 高选择性 | 黄曲霉毒素 · 多环芳烃痕量污染物 | 无荧光基团样品 |
NOTE
一句话选型:能选 UV 就选 UV(覆盖面最广);测糖/醇/甘油必须 RID;做痕量首选 RF。
UV + RID
同时检测样品里含紫外吸收组分 + 糖类组分,食品、饲料、化工样品常用。
UV + RF
常规组分紫外定量,痕量有毒物质荧光高灵敏度检测,粮油、中药材检测实验室常用。